澳门新葡新京手机app下载冷柜价格-冷柜中速冻食品细菌指标(二)

澳门新葡新京手机app下载 2

澳门新葡新京手机app下载冷柜价格-冷柜中速冻食品细菌指标(二)

| 0 comments

 上面一节,冷柜价格已经告诉我们,细菌对冷柜中冷冻食品的影响是很重要的,如果超标,就会严重影响我们的健康,下面就来继续了解这方面的知识吧。一般从食品卫生的角度,对指标细菌的测定通常采用检测中温菌(Mesoj
philes)的方法,严格地说,是检测好气性中温细菌方法。所以采用这种方法,气要是考虑到与肠内细菌等的污染关系,这种检测与培养基种类和培养基温度有关。由于各国不同,或食品种类不同,对培养基的温度也有若干不同的规定,通常是将32~35℃,35~37℃作为培养温度,培养时间为24小时和28小时。

大多数细菌均可以通过人工方法培养,而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。

澳门新葡新京手机app下载 1

   
细菌计数有其实际价值,因为在生产过程中,对各个阶段的许多试样进行常规检验时,可从细菌计数来评价加工制造过程中的卫生情况。如果已知某一批产品的时间和温度,那么通过一定数目试样的检验数据就可以对该食品的卫生情况作出评价。

一、接种与分离方法

医院细菌室所需设备清单及功能简介“”细菌的接种与培养方法操作规程:

澳门新葡新京手机app下载 2

根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。

一、细菌的接种根据待检标本的来源、培养目的及所用培养基的性状,采用不同的接种方法。l、平板画线分离法、连续画线分离法此法主要用于杂菌不多的标本。用接种环取标本少许,于平板l/5处密集涂布,然后回来作曲线连续划线接种,线与线间有一定距离,划满平板为止。、分区画线分离法此法适用于杂菌较多的标本。先将标本均匀涂布于平板边缘一小区(约占平板1/5),再在二、三区依次连续画线,每画线一区均将接种针灭菌一次。每一区的划线均接触上一区的接种线1~2次。以获得单个菌落。2、斜面接种法该法主要用于单个菌落的纯培养。用灭菌接种环取菌少许,从培养基斜面底部向上划一直线,然后从底部向上作连续曲线画线。一直画到斜面顶端。3、液体接种法多用于一些液体生化试验管的接种。用灭菌接种环取菌少许,在试管内壁与液面交接处的管壁上轻轻研磨,使细菌混合于液体中。4、穿刺接种法主要用于半固体培养基、明胶及双糖铁的接种。用接种针取菌少许,从半固体培养基中央,平行于管壁垂直刺入,接近管底但不可接触管底,然后接种针原路退出。5、倾注平板法临床上主要用于尿液等标本的细菌计数。将标本经适当稀释后,取一定量加入已灭菌的平皿内,倾入已经溶化并冷却至45℃左右的定量培养基,混匀,待凝固后倒置、培养。6、涂布接种法常用于纸片药物敏感性测定,也可用于被检标本的细菌计数。加定量的被检菌液于琼脂平板表面,然后用灭菌的L型玻璃棒反复涂布几次,使被检菌均匀分布在琼脂平板表面。然后贴上药敏纸片培养,或直接培养观察结果。二、细菌培养方法根据临床初步诊断及待检细菌的种类,可选用不同的环境进行培养。常用的有需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法。1、需氧培养法本法是临床细菌室常用的培养方法,即将已经接种好的平板、斜面和液体培养基等。置于35℃温箱中孵育18~24小时。2、二氧化碳培养法本室用Co2孵箱将已接种好的培养基置于Co2孵箱内培养。3、厌氧培养(暂时未开展)三、分离及纯化法3.1、分离是指从原材料或多种细菌的混合培养物中将各种细菌彼此独立地分离开,以得到纯的单一菌株,技术步骤如下:作纯培养分离时,一般只用一只完整的琼脂平板。涂划多采用分区划线法,在一只平板中可划3~5个区。划法有两种:3.2、从临床标本分离细菌所含菌数相对较少时,可用接种环取标本涂布在平板一角边缘,然后从此区开始划线至1/3平板,为第一区,再在2、3区依次划线,每划完一个区域均将接种环灭菌一次,冷却后再划下一区域,每一区域的划线均接触上一区域的接种线1~2次,使菌量逐渐减少以获得单个菌落。3.3、快速划线分离法:采用快速划线使一接种环标本能分离出单个菌落,这与标本的菌量及操作者的技能有很大关系。3.4、纯化是指欲获得大量纯培养物的方法,所用平板大小可根据需要的菌量而定。方法是将一单个菌落或将相同的菌落作大量密集涂划于平板上而获得大量纯的培养物。

   
在正常条件下,许多开放式的食品中的细菌往往是从各种设备或传送带的表面沾染的,即使对于设备进行经常的清洗,也总会有少量的病菌会通过容器、设备、传送带的表面,使产品受到污染,有时小的菌块甚至直接会落到产品中去。这种感染方式说明,细菌在生产线上不是均匀分布到产品上去的,因此在检查中,不能遁为一个试样出现阳性反应就否定全部产品。然而必须知道,食品上沾染的细菌确实可能致使产品全部变坏,如不及时采取杀灭措施,即使受到极小量的细菌污染,也.会导致严重的后果。从这个意义上说,细菌学的检查法是整个生产线上不可缺少的监测手段。通过检测,可以判明原料鲜度、生产线上的卫生状况、温控和操作人员卫生情况等,但这不能完全保证食品的安全性,由于不同品种和不同季节,其检查的菌种也不同。

1.平板划线分离培养法

我公司提供医疗临床、食品、制药、生物科研、高校等微生物实验室解决方案,相应的仪器:生物安全柜、超净工作台、高压蒸汽灭菌器、生化培养箱、分光光度计等产品。欢迎来电咨询。

对混有多种细菌的临床标本,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散的单个菌落,以获得纯种。临床送检的标本如痰、咽试子、泌尿生殖道的分泌物和粪便等细菌检验均需要借助琼脂平板划线分离目的菌。平板划线分离法通常有两种方法:

分区划线分离法:此法常用于含菌量较多的标本如痰、泌尿生殖道的分泌物和粪便或混合细菌的分离。先用接种环挑取标本涂布于琼脂平板1区并作数条划线,再于2、3、4区依次划线。每划完一个区域,均将接种环烧灼灭菌1次,冷后再划下一区域,每一区域的划线均与上一区域的划线交接1~3次。一个成功分区划线的平板,培养后分别观察1区形成菌苔,2区菌落连成线,3区和4区可分离到单个菌落。

连续划线分离法:此法常用于含菌量不多的标本或培养物中的细菌分离培养。方法是先将接种物在琼脂平板上1/5处轻轻涂抹,然后再用接种环或拭子在平板表面曲线连续划线接种,直至划满琼脂平板表面。

琼脂斜面接种法

主要用于菌落的移种,以获得纯种进行鉴定和保存菌种等。用接种环挑取单个菌落或培养物,从培养基斜面底部向上划一条直线,然后再从底部沿直线向上曲折连续划线,直至斜面近顶端处止。生化鉴定培养基斜面接种,用接种针挑取待鉴定细菌的菌落,从斜面中央垂直刺入底部,抽出后在斜面上由下至上曲折划线接种。

3.穿刺接种法

此法多用于半固体培养基或双糖铁、明胶等具有高层的培养基接种,半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。接种时用接种针挑取菌落,由培养基中央垂直刺入至距管底0.4cm处,再沿穿刺线退出接种针。双糖铁等有高层及斜面之分的培养基,穿刺高层部分,退出接种针后直接划线接种斜面部分。

4.液体培养基接种法

用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。用接种环挑取单个菌落,倾斜液体培养管,在液面与管壁交界处研磨接种物。此接种法应避免接种环与液体过多接触,更不应在液体中混匀、搅拌,以免形成气溶胶,造成实验室污染。

5.倾注平板法

本法主要用于饮水、饮料、牛乳和尿液等标本中的细菌计数。取纯培养物的稀释或原标本1ml至无菌培养皿内,再将已融化并冷却至45~50℃左右的琼脂培养基15~20ml倾注入该无菌培养皿内,混匀,待凝固后置37℃培养,长出菌落后进行菌落计数,以求出每毫升标本中所含菌数。先数6个方格中菌落数,求出每格的平均菌落数,并算出平皿直径,然后按下列公式计数,求出每毫升标本中的细菌数。

全平板菌落数=每方格的平均菌落数×лr2

每ml标本中的细菌数=全平板菌落数×稀释倍数

6.涂布接种法

本法多用于纸片扩散法药敏试验的细菌接种。将一定量或适量的菌液加到琼脂培养基表面,然后用灭菌的L型玻璃棒或棉拭子于不同的角度反复涂布,使被接种液均匀分布于琼脂表面,然后贴上药敏纸片,或直接培养,本法经培养后细菌形成菌苔。

二、细菌的培养方法

根据不同的标本及不同的培养目的,可选用不同的培养方法。通常把细菌的培养方法分为需氧培养、二氧化碳培养、微需氧培养和厌氧培养四种。

1.需氧培养

是指需氧菌或兼性厌氧菌在有氧条件下的培养,将已接种好的平板、斜面、液体培养基等在空气中置35℃孵育箱内孵育18~24h,无特殊要求的细菌均可生长。少数生长缓慢的细菌需要培养3-7d甚至1个月才能生长。为使孵育箱内保持一定的湿度,可在其内放置一杯水。对培养时间较长的培养基,接种后应将试管口塞好棉塞或硅胶塞后用石蜡-凡士林封固,以防培养基干裂。

2.二氧化碳培养

某些细菌,如肺炎链球菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、布鲁氏菌和流感嗜血杆菌等的培养,特别是在初次分离时,须在5%~10
%二氧化碳环境中培养才能生长。常用的培养法如下。

二氧化碳培养箱法:二氧化碳孵箱能自动调节二氧化碳的含量、温度和湿度,培养物置于孵育箱内阁,孵育一定时间后可直接观察生长结果。

烛缸培养法:取有盖磨口标本缸或玻璃干燥器,将接种好的培养基放入缸内,点燃蜡烛后放在缸内稍高于培养物的位置上,缸盖或缸口均涂以凡士林,加盖密闭。因缸内蜡烛燃烧氧逐渐减少,数分钟后蜡烛自行熄灭,此时容器内二氧化碳含量约占5%~10%。将缸置于35℃普通孵育箱内孵育。

气袋法:选用无毒透明的塑料袋,将已接种标本的培养皿放入袋内,尽量祛除袋内空气后将开口处折叠并用弹簧夹夹紧袋口。使袋呈密闭状态,执断袋内已置的二氧化碳产气管产生二氧化碳,数分钟内就可达到需要的二氧化碳培养环境,置于35℃孵育箱内孵育。

化学法:常用碳酸氢钠-盐酸法。按每升容积称取碳酸氢钠0.4g与浓盐酸0.35ml比例,分别置容器内,连同容器置于玻璃缸内,盖紧密封,倾斜缸位使盐酸与碳酸氢钠接触而生成二氧化碳。于35℃孵育箱内孵育。

3.微需氧培养

微需氧菌培养在大气中及绝对无氧环境中均不能生长,在含有5%-6%
氧气,5%-10%二氧化碳和85%氮气的气体环境中才可生长,将标本接种到培养基上,置于上述气体环境中,35℃进行培养即微需氧培养法。

4.厌氧培养

厌氧菌对氧敏感,培养过程中需造成低氧化还原电势的厌氧环境。厌氧培养常用的方法有:物理法、化学法、生物法。如厌氧罐培养法、气袋法、厌氧手套箱法、需氧菌共生厌氧法等。

三、细菌在培养基上生长特性

1.固体培养基

标本或液体培养物划线接种到固体培养基表面后,单个细菌经分裂繁殖可形成一个肉眼可见的细菌集团,称为菌落。

(1)菌落的形态特征:大小、形状、突起或扁平、凹陷、边缘、颜色、表面、透明度和粘度等。据细菌菌落表面特征不同,可将菌落分为3型:①光滑型菌落:菌落表面光滑、湿润、边缘整齐,新分离的细菌大多呈光滑型菌落。②粗糙型菌落:菌落表面粗糙、干燥、呈皱纹或颗粒状,边缘大多不整齐。R型菌落多为S型细菌变异失去菌体表面多糖或蛋白质形成。R型细菌抗原不完整,毒力和抗吞噬能力都比S型细菌弱。但也有少数细菌新分离的毒力株就是R型,如炭疽孢杆菌、结核分枝菌等。③粘液型菌落:菌落粘稠、有光泽、似水珠样。多见于厚荚膜或丰富粘液层的细菌、结核杆菌等。

(2)菌落溶血特征:菌落溶血有下列3种情况。①α溶血:又称草绿色溶血,菌落周围培养基出现1~2mm的草绿色环,为高铁血红蛋白所致;②β溶血:又称完全溶血,菌落周围形成一个完全清晰透明的溶血环,是细菌产生的溶血素使红细胞完全溶解所致;③γ溶血:即不溶血,菌落周围的培养基没有变化,红细胞没有溶解或缺损。

(3)色素:有些细菌产生水溶性色素,使菌落和周围的培养基出现绿色、金黄色、白色、橙色、柠檬色等颜色,产生的色素有水溶性或脂溶性。

(4)气味:某些细菌在培养基中生长繁殖后可产生特殊气味,如铜绿假单胞菌、变形杆菌、厌氧梭菌、白色假丝酵母菌和放线菌等。

2.液体培养基

细菌在液体培养基中有3种生长现象:大多数细菌在液体培养基生长繁殖后呈均匀混浊;少数链状排列的细菌如链球菌、炭疽芽胞杆菌等则呈沉淀生长;枯草芽胞杆菌、结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌等专性需氧菌一般呈表面生长,常形成菌膜。

3.半固体培养基

半固体培养基主要用于细菌动力试验,有鞭毛的细菌除了沿穿刺线生长外,在穿刺线两侧也可见羽毛状或云雾状混浊生长。无鞭毛的细菌只能沿穿刺线呈明显的线状生长,穿刺线两边的培养基仍然澄清透明,为动力试验阴性。

相关文章

发表评论

Required fields are marked *.


网站地图xml地图